通常對(duì)于轉(zhuǎn)染效率非常高的細(xì)胞，我們建議用沒有TA promoter的質(zhì)粒；對(duì)于轉(zhuǎn)染效率比較低的細(xì)胞，我們建議使用帶有TA promoter的質(zhì)粒。 帶有TA promoter的質(zhì)粒，由于多了一段啟動(dòng)子，本底性的表達(dá)就會(huì)比較高，在轉(zhuǎn)染效率比較低的情況下也比較容易檢測(cè)到。而沒有TA promoter 的質(zhì)粒，本底性表達(dá)相對(duì)比較低，如果轉(zhuǎn)染效率比較低，就很可能檢測(cè)起來有困難。但對(duì)于轉(zhuǎn)染效率比較高的細(xì)胞，由于沒有TA promoter的質(zhì)粒 的本底比較低，有時(shí)更容易觀察到報(bào)告基因的變化或差異。具體選用何種質(zhì)粒效果更好，還要視具體的實(shí)驗(yàn)條件而定。
強(qiáng)烈建議客戶先拿出2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)的過程中，首先將試劑盒中的說明書通讀一遍， 檢查試劑盒中各成分的量與說明書符不符合，溶解或使部分試劑回復(fù)至室溫，然后處理樣本，樣本提取完成后，再溶解一些粉劑，開始實(shí)驗(yàn)。
新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測(cè)定，有一些生理活性物質(zhì)容易降解，建議用新鮮樣本測(cè)定， 如輔酶Ⅰ、輔酶Ⅱ、谷胱甘肽、線粒體復(fù)合體等。冷凍樣本建議在-70℃或者液氮中保存。一般樣本在4度能都 保存一周，-20保存一個(gè)月，-80保存3個(gè)月
由于土壤顆粒大小不一致導(dǎo)致水分含量不一樣，且取樣量較少，為了保證測(cè)定的重復(fù)性，建議將鮮土風(fēng)干并 過篩后取樣。若用鮮土測(cè)定，需保證樣本的顆粒大小一致水分含量相似，建議過40目篩后取樣，且同時(shí)測(cè)定 的樣本要保持一致，最好不要一組樣本用風(fēng)干土，一組用鮮土，風(fēng)干后的土樣在-20保存1個(gè)月測(cè)定大部分酶活 幾乎不會(huì)有損失；某些土壤的成分如硝態(tài)氮、銨態(tài)氮等在風(fēng)干過程中會(huì)發(fā)生顯著變化，必須用新鮮樣品進(jìn)行分析。
樣本研磨我們一般用到三種方法： 第一種：將研缽置于冰盒上勻漿即冰浴勻漿，在勻漿的過程中注意勻漿器浸于冰中，防止因?yàn)槟Σ烈鸬臏囟冗^高，提取液可以在勻漿過程中或者勻漿后加入。 第二種：用液氮?jiǎng)驖{，液氮研磨前將樣本洗凈，盡量剪成小塊，放入研缽中，加入液氮研磨，液氮揮散后盡快加入第二次液氮直至研磨成粉末狀，避免其過程中 反復(fù)凍融，同時(shí)要做好保護(hù)措施，防止凍傷手指。完成后將粉末收集到離心管中加入緩沖液。樣本可以提前稱量號(hào)也可研磨完后稱量。 第三種：使用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿，將稱好的組織放入離心管中，加入適量提取液，加入鋼珠。并將模塊提前遇冷，按照機(jī)器指示進(jìn)行操作。一般的動(dòng)物組織用 該方法效果尚可，有些機(jī)器對(duì)植物組織的處理效果不好。
使用分光光度計(jì)的用戶，用蒸餾水或相應(yīng)的有機(jī)試劑直接調(diào)零。使用酶標(biāo)儀的用戶，可以在一個(gè)孔里加入200μL的蒸餾水或去離子水，作為調(diào)零孔， 也可不用調(diào)零，后續(xù)計(jì)算中會(huì)有空白孔。
樣本測(cè)定值若超出檢測(cè)范圍，可以將提取的上清液用提取液稀釋后重新測(cè)定。一般從高到低，按照2倍，5倍，10倍，20倍的順序，選擇一個(gè)合適的稀釋 倍數(shù)。樣本測(cè)定值若低于檢測(cè)范圍，可以提高樣本濃度，如稱取0.2g樣本加入1mL提取液勻漿，相當(dāng)于將樣本濃縮2倍。
（1）根據(jù)說明書中指定測(cè)定溫度，提前打開保溫設(shè)備（如水浴鍋），設(shè)到指定溫度，在達(dá)到指定溫度后，把冷藏的試劑轉(zhuǎn)移到保溫設(shè)備中保溫10-30分鐘以上，以保證反應(yīng)一開始，就在指定溫度中進(jìn)行。 （2）對(duì)于擁有酶標(biāo)儀的用戶，直接提前預(yù)熱，在達(dá)到設(shè)定溫度后，可以直接把預(yù)熱后的試劑，加入酶標(biāo)板，然后開始反應(yīng)。 （3）在保溫設(shè)備（水浴鍋和金屬浴，最好是前者）進(jìn)行。注意提前對(duì)保溫設(shè)備進(jìn)行預(yù)熱，達(dá)到設(shè)定溫度后再進(jìn)行反應(yīng)。但是僅適用于能夠終止的反應(yīng)。 （4）對(duì)于瞬間完成的反應(yīng)，或者對(duì)溫度不敏感的反應(yīng)，為了提高重復(fù)性，最好在同一溫度下完成檢測(cè)。例如打開空調(diào)，設(shè)定在室溫，如25℃。 當(dāng)然，所有控溫設(shè)備，都要進(jìn)行預(yù)熱。
(1)50管的試劑盒，常量法試劑盒，用分光光度計(jì)檢測(cè)。1mL的比色皿檢測(cè)。 （2）100管的試劑盒，微量法試劑盒，用酶標(biāo)儀（酶標(biāo)板）或者分光光度計(jì)（0.25 mL比色皿）檢測(cè)。
（1）50T/48S：50T指能夠做50次測(cè)定，48S指可以測(cè)試48個(gè)樣品。如果每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次，那么只能測(cè)定16個(gè)樣品。其中有2次測(cè)定用于空白管或者 對(duì)照管。值得特別注意的是，50T/24S中由于每個(gè)樣品測(cè)定都需要做對(duì)照，因此能夠測(cè)定樣品的數(shù)量?jī)H為8個(gè)（假設(shè)做3次重復(fù)） （2）100T/96S：100T指能夠做100次測(cè)定，96S指可以測(cè)定96個(gè)樣品，如果每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次，那么只能測(cè)定32個(gè)樣品。其中有4次測(cè)定用于空白管或 者對(duì)照管。 注意由于瓶璧和移液器吸附等，通常要比理論測(cè)定次數(shù)少1~3次。其它規(guī)格的含義依次類推。值得特別注意的是，100T/48S中由于每個(gè)樣品測(cè) 定都需要做對(duì)照，因此能夠測(cè)定樣品的數(shù)量?jī)H為16個(gè)（假設(shè)做3次重復(fù)）。
一般試劑為粉劑的，可能更多的考慮到配成溶液后的穩(wěn)定性差，如NADH，或者和其他試劑溶解在一起會(huì)在不同的溫度下有其他的化學(xué)反應(yīng)如氯化錳。 -20℃保存的粉劑建議溶解后分裝保存，避免反復(fù)凍融。